tFNA (tetrahesidral Framenetwork Nucleic Acid) 기본 개념 합성 과정 Aptamer 기본 개념 SELEX (Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment): 무작위로 생성된 수많은 ssRNA/DNA 라이브러리 중 특정 표적과 강하게 결합하는 서열을 분획하는 과정 * Kd, Dissociation Constant, 해리상수 : 압타머와 표적의 결합력을 나타내는 값으로 Kd값이 낮을수록 결합력이 강함 ** 압타머 회수 1. 온도 변화 : 70~90℃ 가열을 통해 압타머가 결합한 단백질을 변성시켜 압타머와의 결합을 깨뜨리고 원심분리를 통해 상층액에 존재하는 압타머를 회수함 > 변성 및 열에 민감한 사이드 이펙트 발생 가능성이 있음 2. 경쟁적 용출 : 압타머보다 결합력이 높은 리간드를 사용하여 회수함. 가장 정밀하고 안정적이나 비용이 많이 듦 3. RNase 혹은 알칼리 처리 압타머 변성 가능성이 있어 비선호 됨 tFNA-Aptamer-Drug :…

Tyrosinase Activity Assay 1. 준비  • L-Tyrosine을 완충액1)을 이용하여 2mM L-Tyrosine 용액2)을 제조한다.  • Tyrosinase를 완충액을 이용하여 100U/mL로 희석한다. 2. 반응 혼합  • 샘플(혹은 완충액) 60µL를 96well에 넣는다.  • 2mM L-Tyrosine 용액을 각 well에 100µL씩 넣는다.  • 100U/mL Tyrosinase 용액을 각 well에 20µL씩 넣는다. 3. 흡광도 측정  • 37°C 인큐베이터에 넣고 10분간 반응시킨다.  • 마이크로플레이트 리더를 사용하여 490nm 파장에서 흡광도를 측정한다.  • 다시 37°C 인큐베이터에 넣고 5분간 반응시킨다.  • 흡광도의 변화가 나타나지 않을 때 까지(약 30분) 위 과정을 반복한다. 4. 결과분석  • 타이로시네이스 억제율을 계산한다. ((%) = [(대조군 흡광도 – 샘플군 흡광도) / 대조군 흡광도] × 100)  • 농도별 억제율을 그래프로 작성하여 샘플의 효능을 평가한다. —  • 1) 0.1M pH…

1. Hematoxylin & Eosin (H&E) Staining 1. 준비 a. Hematoxylin Solution  • Hematoxylin을 증류수를 이용하여 0.5%의 농도로 용해한다. (0.5g/100mL)  • Aluminum sulfate를 5%의 농도로 추가하여 용해한다. (5g/100mL)  • 혼합된 Hematoxylin 용액을 70°C 항온조에 24시간 보관한다.  • 필터를 통해 불순물을 제거한 뒤 만들어진 Hematoxylin 용액을 차광된 상태에서 실온에 보관한다. b. Eosin Solution  • Eosin을 95% Ethanol을 이용하여 1%의 농도로 용해한다. (1g/100mL) 2. 탈파라핀화  • 슬라이드를 자일렌에 1분씩 2회 담가 파라핀을 제거한다.1)  • 재수화를 위해 100, 90, 80, 70% 에탄올 및 증류수에서 각각 2분간 담가 세척한다. 3. 염색  • 슬라이드를 Hematoxylin 용액에 3분간 담가 염색한다.  • 염색 후 증류수에 2분간 담가 세척한다. 4. 대조 염색  • 슬라이드를 Eosin 용액에 3분간 담가 염색한다.…